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蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定


蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定


【技術(shù)簡(jiǎn)介】

1)技術(shù)原理

單一蛋白的質(zhì)譜鑒定:用蛋白酶將蛋白質(zhì)消化成肽段混合物,經(jīng)MAILDIESI等軟電離手段將其離子化,然后通過(guò)質(zhì)量分析器將具有特定質(zhì)核比的肽段離子分離開(kāi)來(lái)。通過(guò)實(shí)際譜圖和理論上蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)蛋白酶消化后產(chǎn)生的一級(jí)質(zhì)譜峰圖和二級(jí)質(zhì)譜峰圖進(jìn)行的比對(duì),進(jìn)行蛋白鑒定。

混合蛋白樣品的質(zhì)譜鑒定:混合蛋白樣品的質(zhì)譜鑒定的方法被稱(chēng)為“鳥(niǎo)槍法”或者多維蛋白質(zhì)鑒定技術(shù)(Mud PIT)。現(xiàn)將蛋白溶液或SDS-PAGE條帶酶切成肽段混合物,再用高效液相色譜將其分離成簡(jiǎn)單組分,最后依次導(dǎo)入高分辨率質(zhì)譜儀中進(jìn)行質(zhì)量分析。

(2)技術(shù)應(yīng)用

    蛋白質(zhì)表達(dá)譜和混合蛋白質(zhì)的鑒定;相互作用蛋白質(zhì)的鑒定;稀有物種的蛋白質(zhì)組鑒定。

【服務(wù)內(nèi)容】

蛋白質(zhì)樣本制備(客戶(hù)可提供一制備好的樣本,如蛋白溶液或SDS-PAGE條帶),包括蛋白質(zhì)的分離、純化、酶切;蛋白質(zhì)酶切、液相分離、質(zhì)譜鑒定和數(shù)據(jù)庫(kù)檢索。

【客戶(hù)須知及標(biāo)本要求】

1)客戶(hù)須明確檢測(cè)目的和具體要求,最好能提供1~2篇文獻(xiàn)或資料。

2)樣品來(lái)源:考染蛋白質(zhì)全部接受;銀染的蛋白質(zhì)不得使用戊二醛作為固定劑;蛋白質(zhì)干粉;蛋白質(zhì)溶液等。

3)寄送要求:蛋白質(zhì)條帶可用冰袋包裝寄送,蛋白質(zhì)溶液用干冰或液氮寄送。